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SEM掃描電鏡如何制備含水的樣品

日期:2024-08-27 09:03:44 瀏覽次數(shù):80

掃描電鏡在制備含水樣品時(shí),需要特別注意樣品的干燥和導(dǎo)電處理,以確保在真空環(huán)境中能夠獲得清晰的圖像并保護(hù)設(shè)備。以下是制備含水樣品的主要步驟和注意事項(xiàng):

一、樣品準(zhǔn)備

取材:選擇新鮮、具有代表性的含水樣品,如生物組織、高分子材料等。確保樣品大小適中,以便于處理和觀察。

清洗:去除樣品表面的雜質(zhì)、污垢和多余的水分。對(duì)于生物樣品,可能需要使用緩沖液或生理鹽水進(jìn)行清洗,以確保樣品表面的清潔。

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二、固定與脫水

固定:使用化學(xué)固定劑(如戊二醛)對(duì)樣品進(jìn)行固定,以防止樣品在后續(xù)處理過(guò)程中發(fā)生形態(tài)變化。固定時(shí)間根據(jù)樣品類(lèi)型和大小而定,一般需要數(shù)小時(shí)至數(shù)天。

脫水:通過(guò)梯度脫水法逐步去除樣品中的水分。常用的脫水劑包括乙醇或丙酮,濃度從低到高依次進(jìn)行(如30%、50%、70%、90%、****),每個(gè)梯度浸泡一段時(shí)間,直至樣品完全脫水。

三、干燥

臨界點(diǎn)干燥(CPD):這是一種常用的干燥方法,可以避免樣品在干燥過(guò)程中發(fā)生收縮和變形。在臨界點(diǎn)干燥過(guò)程中,樣品中的水逐漸被乙醇取代,然后乙醇被液態(tài)二氧化碳取代。通過(guò)增加壓力和溫度,使CO2達(dá)到臨界點(diǎn)并轉(zhuǎn)變?yōu)闅庀啵瑥亩コ龢悠分械乃帧?/span>

冷凍干燥:另一種有效的干燥方法,適用于對(duì)溫度敏感的樣品。冷凍干燥通過(guò)蒸發(fā)去除樣品中的冷凍水,保持樣品的原始形態(tài)和結(jié)構(gòu)。樣品在低溫下被冷凍,然后在真空環(huán)境中逐漸升溫,使水分以冰晶的形式直接升華。

四、導(dǎo)電處理

由于含水樣品在干燥后可能仍然具有較差的導(dǎo)電性,因此需要進(jìn)行導(dǎo)電處理。常用的導(dǎo)電處理方法包括:

鍍金或鍍碳:在樣品表面鍍上一層金屬(如金、鉑)或碳膜,以提高樣品的導(dǎo)電性和二次電子發(fā)射率。

使用導(dǎo)電膠:將樣品粘結(jié)在導(dǎo)電膠帶上,以確保樣品與樣品臺(tái)之間的良好接觸和導(dǎo)電性。

五、注意事項(xiàng)

保持樣品原始形態(tài):在整個(gè)制備過(guò)程中,應(yīng)盡量避免對(duì)樣品造成機(jī)械損傷和化學(xué)腐蝕,以保持樣品的原始形態(tài)和結(jié)構(gòu)。

控制干燥條件:根據(jù)樣品的特性和要求選擇合適的干燥方法和條件,以防止樣品在干燥過(guò)程中發(fā)生變形或損壞。

注意安全和衛(wèi)生:在處理含水樣品時(shí),應(yīng)遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)定和衛(wèi)生要求,確保操作人員的安全和健康。

調(diào)整SEM掃描電鏡參數(shù):在將制備好的樣品放入掃描電鏡中進(jìn)行觀察時(shí),應(yīng)根據(jù)樣品的特性和觀察要求調(diào)整SEM掃描電鏡的加速電壓、工作距離、束流大小等參數(shù),以獲得高質(zhì)量的圖像。

通過(guò)以上步驟和注意事項(xiàng),可以制備出適合掃描電鏡觀察的含水樣品,并獲得清晰、準(zhǔn)確的圖像結(jié)果。

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